原代培養(yǎng)及永生化星形膠質(zhì)細胞和C6膠質(zhì)瘤細胞的分子和功能表征
原代培養(yǎng)及永生化星形膠質(zhì)細胞和C6膠質(zhì)瘤細胞的分子和功能表征:永生化星形膠質(zhì)細胞和C6細胞的分化星形膠質(zhì)細胞標(biāo)志物(如GFAP、S100B、AQP4和ALDH1L1)均呈陽性,但表達量低于原代星形膠質(zhì)細胞培養(yǎng)物,增殖細胞的谷氨酸代···
原代培養(yǎng)及永生化星形膠質(zhì)細胞和C6膠質(zhì)瘤細胞的分子和功能表征:永生化星形膠質(zhì)細胞和C6細胞的分化星形膠質(zhì)細胞標(biāo)志物(如GFAP、S100B、AQP4和ALDH1L1)均呈陽性,但表達量低于原代星形膠質(zhì)細胞培養(yǎng)物,增殖細胞的谷氨酸代···
小鼠星形膠質(zhì)細胞 (Astrocytes)分離培養(yǎng):1. 取3個10 cm 培養(yǎng)皿,3個6 cm 培養(yǎng)皿倒入HBSS緩沖液,置于冰盤上;2. 取出生2天內(nèi)的新生鼠,泡入裝有75%酒精的離心管內(nèi);3. 待小鼠死亡后,在1中漂洗2-3次;4. 取腦子:用尖頭鑷剝離···
NK細胞高效分離培養(yǎng):D0天:約用10 mL NK基礎(chǔ)培養(yǎng)基,培養(yǎng)基加入因子NK-A、NK-B、NK-C、NK-D和5%自體血漿將制備好的單個核細胞(PBMC)重懸,按細胞密度1.0-2.0M cells/mL鋪于T-75瓶中搖晃混勻后做好標(biāo)記,放入培養(yǎng)箱中進行···
大鼠下丘腦神經(jīng)干細胞(NSCs)分離培養(yǎng):1. 將新生鼠(1-3天)放到6 厘米細胞培養(yǎng)皿蓋上,噴酒精后放置超凈工作臺中;2. 在6 厘米培養(yǎng)皿中入2-3 毫升 PBS緩沖液;3. 將新生鼠的頭直接剪下來,放入PBS緩沖液中漂洗掉血漬;4. 在···
大鼠成骨細胞 (Osteoblasts) 分離培養(yǎng):1.取2-3天新生鼠,并用70%乙醇消毒,將新生放入一個大培養(yǎng)皿中;2.用大剪刀取下頭部,抓住頸背處的頭部,沿著顱底做一個小切口,使用鑷子和鑷子小心地從頭骨上去除皮膚和腦組織;3.切掉···
小鼠骨髓來源巨噬細胞的永生化方案:1. 在 37 °C、5% CO2 的加濕培養(yǎng)箱中,用 T150 cm2 的 TC 燒瓶,在完全 DMEM 中培養(yǎng) Cre-J2 病毒生產(chǎn)細胞,直到細胞達到 ~100% 的融合度;2. 吸出細胞中的全 DMEM,用 10 mL 無菌 PBS ···
如何用SV40大T抗原永生大鼠腹側(cè)間腦NPCs:按照Timmer等人的方法培養(yǎng)從E12大鼠胚胎中制備的VM祖細胞,在增殖條件下培養(yǎng)3天后,用pSV3-neo核轉(zhuǎn)染細胞以表達SV40Tag,在G418選擇條件下培養(yǎng)2周后,通過稀釋獲得克隆,從四個SV4···
海拉細胞的回溯,細胞系的錯誤鑒定如何誤導(dǎo)了科學(xué)文獻:雖然細胞系錯誤識別問題幾十年前就已為人所知,但仍有數(shù)量不詳?shù)囊寻l(fā)表論文在沒有警告或糾正的情況下報告了錯誤的細胞,在這里,研究者團隊試圖對這些“被污染”的文···
SV40永生化大鼠腮腺腺癌細胞株的開發(fā)與特征描述:過去幾年中,在確定大鼠唾液腺尖突細胞無血清原代培養(yǎng)對營養(yǎng)、激素、氧氣和生長的要求方面取得了重大進展,維持尖腺細胞細胞分化和正常分泌功能所必需的重要細胞外基質(zhì)蛋···
huvec細胞血管形成實驗及常見問題:HUVEC 是從臍帶靜脈內(nèi)壁分離出來的原代細胞,內(nèi)皮細胞常用于研究低氧、炎癥、氧化應(yīng)激、感染反應(yīng)及正常和腫瘤相關(guān)血管生成等應(yīng)用,HUVEC細胞血管實驗常見問題:1.稀釋基質(zhì)膠用什么稀釋···
huvec人臍靜脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)方法和常見問題:1.將含有1 mL HUVEC細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻;2.在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻;HUVEC細胞必須用專用···
人子宮內(nèi)膜異位病灶來源的永生化基質(zhì)細胞系的建立:慢病毒感染建立hTERT誘導(dǎo)的永生化子宮內(nèi)膜異位基質(zhì)細胞,與原代細胞相比,ihESCs 中hTERT的mRNA和蛋白質(zhì)均顯著增加,此外,光學(xué)顯微鏡(上圖1d)和掃描電鏡(下圖1d)觀察到···
RAW 264.7細胞培養(yǎng)注意事項和常見問題:在培養(yǎng)RAW264.7細胞的過程中容易遇到的問題主要包括以下幾種:1.復(fù)蘇后存活率不高;2.細胞形態(tài)發(fā)生變異;3.不同形態(tài)細胞消化時間不等;4. 細胞生長速度緩慢;當(dāng)你遇到類似問題時,可嘗···
來自CX43野生型和基因敲除小鼠的永生化小鼠皮質(zhì)星形膠質(zhì)細胞的構(gòu)建和鑒定:WT 和 Cx43-Null 星形膠質(zhì)細胞原代培養(yǎng)物中星形膠質(zhì)細胞標(biāo)志物表達水平的量化,以及用 hTERT 轉(zhuǎn)染每種基因型后的通道,永生化皮質(zhì)星形膠質(zhì)細胞···
肺癌研究常用細胞系及其優(yōu)化實驗方案:A549肺部上皮樣細胞,免疫組化實驗顯示Karetin陽性;有研究顯示該細胞系在不飽和脂肪酸比例較高的條件下,可以合成Lecithin,Calu-1取自肺癌的肋膜轉(zhuǎn)移灶,為上皮樣細胞,該細胞系接種···
單克隆穩(wěn)定株和混合穩(wěn)定株概念和選擇:單克隆穩(wěn)定株:來源于含有穩(wěn)定整合外源片段的單個細胞的擴增;混合穩(wěn)定株:由多個單克隆穩(wěn)定株混合構(gòu)成的克隆群,不同的單克隆其外源片段的整合位點不一樣;什么時候選擇混合克隆穩(wěn)定···
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