hPSC誘導(dǎo)分化神經(jīng)干/祖細(xì)胞(iNSPC-H1)

貨號：IMI-SP01H1

價(jià)格：

￥8500

規(guī)格：

貨號：IMI-SP01H1

規(guī)格：1x10⁶cells/T25或1mL凍存管

形態(tài)：球形細(xì)胞樣，懸浮生長

培養(yǎng)基：NSPC擴(kuò)增培養(yǎng)基

培養(yǎng)環(huán)境：氣相：95%空氣+5%二氧化碳;溫度：37℃

傳代比例：500000 cells/mL 接種傳代（約1:2至1:3）

產(chǎn)品貨期：1周左右

hPSC誘導(dǎo)分化神經(jīng)干/祖細(xì)胞說明書

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產(chǎn)品描述

一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱	hPSC誘導(dǎo)分化神經(jīng)干/祖細(xì)胞(iNSPC-H1)
種屬來源	人
組織來源	人胚胎干細(xì)胞（H1）
生長特性	懸浮生長
細(xì)胞形態(tài)	球形細(xì)胞樣
細(xì)胞代數(shù)	10代以內(nèi)
細(xì)胞規(guī)格	1×10⁶cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
培養(yǎng)基	NSPC擴(kuò)增培養(yǎng)基（含NSPC擴(kuò)增基礎(chǔ)培養(yǎng)基，貨號IMI-SP01BM2；NSPC擴(kuò)增培養(yǎng)基補(bǔ)充劑，貨號IMI-SP01C）
培養(yǎng)條件	氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
傳代方法	500000 cells/mL 接種傳代（約1:2至1:3）
凍存條件	神經(jīng)細(xì)胞無血清凍存液（貨號IMC-704），液氮儲(chǔ)存
支原體檢測	無
免疫熒光鑒定
細(xì)胞貨期	現(xiàn)貨，1周左右
發(fā)貨方式	復(fù)蘇發(fā)貨（免運(yùn)輸費(fèi)用）/ 凍存發(fā)貨（需加干冰運(yùn)輸費(fèi)用）順豐快遞
供應(yīng)限制	僅限于科學(xué)研究，絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
特別說明	以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
復(fù)蘇細(xì)胞	將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL NSPC擴(kuò)增培養(yǎng)基（含10μM Y-27632）混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL NSPC擴(kuò)增培養(yǎng)基（含10μM Y-27632）后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量NSPC擴(kuò)增培養(yǎng)基（含10μM Y-27632）的低吸附六孔板（1孔）或低吸附35mm皿中培養(yǎng)過夜。24h后，100g離心棄去上清，換成不含Y-27632的NSPC擴(kuò)增培養(yǎng)基，視培養(yǎng)基顏色或隔2天半量換液。
細(xì)胞傳代	當(dāng)神經(jīng)球直徑達(dá)100-150μm時(shí)，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。 a、100g離心棄去上清，加入1-2 mL Accutase(含10μM Y-27632)，置于37℃水浴消化10-15 min。 b、10-15 min后每孔加入等量 NSPC擴(kuò)增培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞，使細(xì)胞解離成小團(tuán)塊或單細(xì)胞。 c、將細(xì)胞懸液收集到15 mL離心管中，室溫下300 g離心5 min。 d、仔細(xì)抽吸上清液，不干擾細(xì)胞，用1mL恢復(fù)室溫的NSPC擴(kuò)增培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，輕輕地上下移液以確保細(xì)胞溶液均勻。 e、使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)細(xì)胞，使用臺盼藍(lán)排除死亡細(xì)胞，使用NSPC擴(kuò)增培養(yǎng)基稀釋細(xì)胞，將細(xì)胞以5×105/mL(或1:2-1:3比例)接種到低吸附六孔板中。
細(xì)胞凍存	待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面以低吸附T25為例; a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入離心管中，100g離心5 min，棄上清液，加入2 mL Accutase(含10μM Y-27632)水浴消化15 min，。 b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入神經(jīng)細(xì)胞無血清凍存液，使細(xì)胞密度1×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。 c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
培養(yǎng)注意事項(xiàng)	1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。 2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。 3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置2-4h。 4. 客戶可購買逸漠生物NSPC擴(kuò)增培養(yǎng)基(含NSPC擴(kuò)增基礎(chǔ)培養(yǎng)基，貨號IMI-SP01BM2;NSPC擴(kuò)增培養(yǎng)基補(bǔ)充劑，貨號IMI-SP01C)。 5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。 6.該細(xì)胞僅供科研使用。 7. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 8. 注意： 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者1個(gè)六孔板(或按照底面積換算)，必須使用低吸附培養(yǎng)器皿，或經(jīng)過特殊液體潤洗使得細(xì)胞難以貼于培養(yǎng)器皿表面。
備注：客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，有任何技術(shù)問題可以撥打技術(shù)服務(wù)電話：400-080-3389 按 2，我們隨時(shí)給予解答。
三、售后服務(wù)
重發(fā)標(biāo)準(zhǔn)	1.細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題，細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等，重發(fā); 2.收到細(xì)胞未開封，如出現(xiàn)污染狀況，重發(fā); 3.收到細(xì)胞3天內(nèi)，發(fā)現(xiàn)污染問題，經(jīng)核實(shí)后，重發(fā); 4.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 2 小時(shí)后，干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇 2 天后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，經(jīng)核實(shí)后，重發(fā); 5.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 22 小時(shí)并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇 2 天后，出現(xiàn)污染，經(jīng)核實(shí)后，重發(fā); 6.細(xì)胞活性問題，請?jiān)谑盏疆a(chǎn)品 3 天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，經(jīng)核實(shí)后，重發(fā); 7.視具體情況而定。
不予重發(fā)	1.客戶操作造成細(xì)胞污染，不重發(fā); 2.客戶嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā); 3.非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā); 4.細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供真實(shí)清晰的培養(yǎng)前 3 天的細(xì)胞狀態(tài)照片，不重發(fā); 5.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題的，不重發(fā); 6.收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時(shí)間證明大于3天的，不重發(fā); 7.視具體情況而定。