結直腸癌(Colorectal cancer，CRC)是一種起源于結腸或直腸內的惡性腫瘤。根據(jù)國家癌癥中心最新統(tǒng)計數(shù)據(jù)，我國結直腸癌發(fā)病率居惡性腫瘤第二位，死亡率居第四位，結直腸癌的治療方法通常包括手術切除、放療、化療和靶向治療等。結直腸癌(Colorectal cancer，CRC)是一種起源于結腸或直腸內的惡性腫瘤。根據(jù)國家癌癥中心最新統(tǒng)計數(shù)據(jù)，我國結直腸癌發(fā)病率居惡性腫瘤第二位，死亡率居第四位，結直腸癌的治療方法通常包括手術切除、放療、化療和靶向治療等。手術切除是最常見的治療方法。放療和化療常常與手術聯(lián)合應用，以清除殘余癌細胞或控制腫瘤的擴散。靶向治療是一種針對特定癌癥細胞的治療方法，通過抑制細胞生長或破壞其發(fā)展的信號傳遞途徑來達到治療的效果。常見的化療藥物有5-氟尿嘧啶、奧沙利鉑、卡培他濱以及靶向治療藥物：如抗EGFR抗體(如西妥昔單抗，Cetuximab)和抗VEGF抗體(如貝伐珠單抗，Bevacizumab)等。

結直腸癌常用的動物模型

腫瘤模型對研究腫瘤生長的生物學過程和抗腫瘤治療藥物的研發(fā)非常重要。國內外建立結直腸癌動物模型的報道有很多，大體可以分為以下三種：

化學誘導模型 

誘發(fā)型結直腸癌模型多采用化學誘發(fā)途徑，常用的誘導劑有二甲基肼(dimethylhydrazine,DMH)、氧化偶氮甲烷(azoxymethane,AOM)及致炎劑葡聚糖硫酸鈉(dextran sulfate sodiuln, DSS)。DMH本身不致癌，但在肝細胞內質網(wǎng)被氧化成甲基氧化偶氮甲醇，隨膽汁進入腸腔，導致結直腸癌上皮癌變。AOM是DMH在肝臟的代謝產(chǎn)物，它通過DNA烷化，促進堿基的錯誤配對，導致腸癌的發(fā)生。

轉基因小鼠模型

在結直腸癌研究中，轉基因小鼠模型可以模擬結直腸癌的發(fā)展和機制。以下是一些常見的轉基因腸癌小鼠模型

1.APC Min/+ 小鼠模型是最常見的腸癌模型之一。其利用APC基因突變模擬人類腸癌中的APC基因突變。這個突變會影響Wnt信號通路的調控，導致細胞增殖異常，促進腫瘤的發(fā)展。APC Min/+ 小鼠會產(chǎn)生多發(fā)性腸道腺瘤，最終導致結腸腺癌的產(chǎn)生。這是一種遺傳模型，不能模擬所有腸癌的變異情況，但是研究腸道腫瘤發(fā)展和藥物治療評價非常有用的小鼠模型。

2.Villin-CreERT2;APC flox/flox 模型是另一種常用于研究腸癌的轉基因小鼠模型，它結合了Villin基因驅動的Cre酶表達和APC基因的floxed(flanked by loxP sites)序列，通過給予小鼠誘導劑(如tamoxifen)激活Cre酶，可以在特定時間點誘導APC基因的缺失，引發(fā)腸癌。該模型可以模擬腸癌的發(fā)展，并研究在特定時間點缺失APC基因對腸道腫瘤的影響。

3.LSL-K-ras G12D模型是一種用于研究腫瘤發(fā)展和癌基因K-ras的小鼠模型。K-ras G12D 的過度激活已與多種癌癥相關，包括肺癌和結直腸癌。這個模型為了激活K-ras G12D 突變，使用Cre酶來剪切l(wèi)oxP位點，從而激活K-ras基因的表達，促進癌癥的產(chǎn)生。該模型可用于研究K-ras G12D 在腫瘤發(fā)展中的作用。

移植瘤模型

結直腸癌移植瘤模型主要分為三種：同源腫瘤移植瘤模型(Syngeneic)、人腫瘤細胞株異種移植模型(CDX)、患者來源的腫瘤異種移植模型(PDX)。

同源腫瘤移植瘤模型(Syngeneic)

常見的同源移植結直腸癌模型是使用結直腸癌細胞系在同種動物體內進行移植的模型。以下是一些常見的同源結直腸癌模型：

1.CT26 細胞系模型是一種常用于癌癥研究的小鼠同源移植結直腸癌模型。CT26細胞系最早由Balb/c小鼠的結腸腺癌組織中分離出來，將其接種于Balb/c小鼠構建而成的移植瘤模型被廣泛用于腫瘤生物學、藥物治療以及免疫治療研究等領域。

2.MC38 細胞系模型是一種用MC38細胞系在小鼠體內進行同源小鼠移植結腸癌模型。MC38細胞最早是由C57BL/6小鼠的結腸腺癌組織中分離獲得的，將其接種于C57BL/6小鼠構建而成的移植瘤模型常用于研究腫瘤生物學和腫瘤的免疫治療等。

3.CMT93 細胞系模型是用 CMT93 細胞系的同源小鼠移植結腸癌模型。CMT93 細胞系是從Balb/c 小鼠的結腸腺癌組織中分離獲得的細胞系，將其接種于Balb/c小鼠構建而成的移植瘤模型被廣泛用于實驗室研究，模擬小鼠結腸腺癌的發(fā)展等。

CDX模型(Cell Derived Xenograft)

CDX模型是指將人源腫瘤細胞株接種于免疫缺陷小鼠構建的腫瘤移植模型。接種部位主要是皮下接種和原位接種。皮下接種荷瘤小鼠模型耗時短、費用低、操作簡單，但很少出現(xiàn)轉移。原位接種荷瘤小鼠模型腫瘤生長微環(huán)境與現(xiàn)實更相似，但操作更復雜且易出現(xiàn)轉移。常見的結直腸癌細胞株CDX模型有HCT-116、SW620、SW480、Caco-2、HT-29、 COLO 205、 LS 180等。

PDX模型(Patient Derived Xenografts)

PDX模型是將患者來源的癌癥組織接種于免疫缺陷小鼠體內構成的模型。該模型保留了原發(fā)腫瘤的細胞和組織病理學結構，基因組和基因表達譜也很大程度被保留，對臨床療效的可預測性達到80%以上，是目前公認的準確性最高的腫瘤學研究模型。但由于PDX模型構建成本高，患者的癌組織或細胞不易獲得，成瘤時間長，成瘤率低等原因，因此PDX模型特別珍貴。南昌樂悠生物科技有限公司已成功構建了47例腸癌PDX，為腫瘤基礎研究及抗癌藥物臨床前藥效評價提供了有效工具。

結直腸癌(colorectal cancer，CRC)是胃腸道中常見的消化道惡性腫瘤，其發(fā)病率和病死率在消化系統(tǒng)惡性腫瘤中僅次于胃癌、食管癌和原發(fā)性肝癌，發(fā)病原因尚未明確。因此，結直腸癌的發(fā)病機制、進展及藥物治療研究成為了醫(yī)學研究的熱點，而作為研究的基礎材料，結直腸癌細胞系的選擇十分重要，我們常用的結直腸癌細胞系有哪些呢

結直腸癌常用細胞株(Cell lines )

HCT-116細胞株

來源于一名52歲男性患者結腸腺癌組織;屬于中等分化的細胞株;細胞通常呈現(xiàn)多角形的形態(tài);基因譜表達CEA+，keratin+、TGF β 1+和TGF β 2 +; ras原癌突變基因。

SW620細胞株

來源于一名51歲男性患者Dukes’C 型結腸腺癌大腸組織;與SW480是同一病人一年后復發(fā)的轉移灶，已轉移至淋巴結;基因譜表達CEA+、TGF β+、keratin+、myc+、myb+、ras+、fos+、sis+、p53+、abl-、ros-、src-、CSAp-和colon antigen 3-。

SW480細胞株

來源于一名50歲白人男性患者的Duckes’C 型原位結腸腺癌組織;屬于相對較低分化的細胞株;細胞呈現(xiàn)典型的上皮細胞形態(tài);基因譜表達CEA+、TGF β+、myc+、myb+、ras+、fos+、sis+、p53+、abl-、ros-、src- 及EGF+。

Caco-2細胞株

來源于一名72歲的白人男性II期中等分化原位結腸腺癌患者的腫瘤組織;基因譜表達keratin+、Retinic acid binding protein 1+、retinol binding protein 2+。

HT-29細胞

1964年由Fogh J用移植培養(yǎng)方法和含15%FBS的F12培養(yǎng)液從原發(fā)性腫瘤分離的。該細胞系在裸鼠中成瘤，也能在類固醇處理的地鼠中成瘤，可合成IgA、CEA、TGFβ結合蛋白和黏液素，表達尿激酶受體，但沒有檢測到血漿酶原活性，不表達CD4，但細胞表面表達半乳糖神經(jīng)酰胺(HIV的可能替代受體)。該細胞系癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb、sis、fos陽性;p53基因過表達，并且在273位密碼子存在G→A突變。

LS174T細胞株

是LS 180結腸腺癌細胞株用胰蛋白酶傳代的變異種，比親本更易傳代，能生成大量的癌胚抗原(CEA)。有豐富的微絲和細胞質黏液素液泡;抗原顯示colon cancer antigen 3+、p53-、keratin+;癌基因表達c-myc+、N-myc+、H-ras+、N-ras+、Myb+和fos+;可產(chǎn)生IL-10、IL-6和黏蛋白。

COLO 205：1957年由T.U.Sample等從患有結腸癌的70歲男性白人的腹水中分離的。該病人在取腹水樣品前已用5-氟尿嘧啶治療4~6周。角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性;產(chǎn)生CEA、IL10。

LS180細胞株

來源于一名58歲白人女性患者Duckes’B 型結腸腺癌組織;基因譜表達CEA+、IL10+、IL6+、mucin+;colon antigen 3-。

SW1116細胞株

來源于人三期結腸腺癌轉，上皮細胞，CSAp陰性，結腸抗原3陰性，角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性，癌基因c-myc，K-ras，H-ras，Myb，sis和fos的表達呈陽性，未檢測到癌基因N-myc和N-ras的表達，表達腫瘤特異的核基質蛋白CC-4、CC-5和CC-6。

LOVO細胞株

LoVo建自1971年，從診斷為結腸腺癌的56歲男性白人的一個轉移到左鎖骨上區(qū)的腫瘤結節(jié)建系。癌基因c-myc，K-ras，H-ras，N-ras，Myb，sis和fos的表達呈陽性，未檢測到N-myc的表達。該細胞在裸鼠中能成瘤，表達腫瘤特異的核基質蛋白蛋白CC-3和CC-4。

HCT-15細胞系

來源于人結直腸腺癌組織，上皮細胞，細胞呈CSAp陰性，角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性，表達癌胚抗原。

LS 180細胞

來源于人結腸組織，上皮細胞，表達抗體：結腸癌抗原3，人類表達HLAA2，B13，B50，表達基因：癌胚抗原(CEA)，白細胞介素10，白細胞介素6，粘蛋白。

NCI-H716細胞

1984年建系，源自一位33歲患有大腸腺癌男性經(jīng)5-fu治療后的腹水?？稍诼闶笾谐闪?。細胞表達多巴脫羧酶，細胞質中有核心致密的內分泌型顆粒。細胞不表達TAG-72，CA19-9和CEA。

COLO 320細胞株

來源于結腸組織，結腸腺癌細胞，該細胞能合成復合胺，腎上腺素。

COLO 320DM細胞株

來源于Dukes氏C型結直腸腺癌組織，結直腸腺癌細胞，CEA、CSAp和結腸抗原3呈陰性，該細胞可產(chǎn)生5-羥色胺、去甲腎上腺素、腎上腺素、ACTH和甲狀旁腺素。角蛋白、波形蛋白弱陽性。

CT26.WT細胞株

CT26 是以N-nitroso-N-methylurethane-(NNMU)誘導形成的未分化結腸癌細胞株，它克隆形成的細胞株命名為CT26.WT。用包含編碼典型腫瘤相關抗原(TAA) beta-半乳糖苷酶(beta-gal)的lacZ基因的逆轉錄病毒載體LXSN穩(wěn)定轉染CT26.WT，得到致死的亞克隆CT26.CL25。即使CT26.CL25表達了典型的TAA beta-半乳糖苷酶，在正常小鼠中CT26.CL25 和 CT26.WT的生長率與致死率也保持基本一致。與CT26.CL25 一起可用作測試免疫治療程序的模型，并用于研究宿主免疫反應。

DLD-1細胞株

1977-1979年間D.L. Dexter和同事分離的兩株結直腸腺癌細胞株中的一株。細胞的CSAp陰性(CSAp-)。DLD-1細胞的p53 抗原表達呈陽性(p53抗原產(chǎn)生了一個C→T點突變導致241位的Ser→Phe)。角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。癌基因c-myc, K-ras, H-ras, N-ras, myb, sis 和fos的表達呈陽性。癌基因N-myc的表達未做檢測。表達腫瘤特異性核基質蛋白CC-2,CC-3,CC-4,CC-5和CC-6。

RKO細胞系

是一個低分化的結腸癌細胞系。RKO細胞含有野生型P53，但缺乏人甲狀腺受體核受體(h-TR beta 1)。RKO細胞的P53蛋白的水平高于RKO-E6細胞。RKO細胞系是RKO-E6和RKO-AS45-1的親本細胞系。該細胞系在裸鼠中成瘤，且在軟瓊脂中形成集落。

RKO-E6細胞株

是用脂質體法轉染pCMV-E6的結腸癌RKO細胞系。該細胞含有穩(wěn)定整合受控於巨細胞病毒啟動子的人乳頭狀病毒(HPV)E6癌基因。RKO-E6細胞系和它的母系RKO一起可用于研究p53缺失引起的細胞參數(shù)改變p53介導的轉錄和凋亡等。

RKO-AS45-1細胞

人的cDNA中編碼GADD45的開放閱讀框克隆到表達載體pCMV.3中，轉染結腸癌細胞RKO，建立了RKO-AS45-1細胞株。該細胞含有穩(wěn)定整合巨細胞病毒(CMV)啟動子的表達載體。RKO-AS45-1細胞系和它的母系RKO一起可用于Gadd45對DNA修復、凋亡和藥物敏感性研究。

T84細胞

來源于一位72歲的男性結直腸癌患者的肺部轉移灶;皮下接種至BALB/c裸鼠并連續(xù)傳代23次后建立該細胞系。在裸鼠身上傳代的過程中，該腫瘤仍保持原始的結直腸癌的組織學特性。T84細胞系生長至飽和狀態(tài)時形成單層細胞，相鄰細胞間有緊密連接和細胞橋粒;該細胞有多種肽類激素、神經(jīng)遞質和維持電解質的定向運輸?shù)氖荏w，角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。

常見結直腸癌細胞株有哪些和結直腸癌常用的動物模型介紹，各位科研老師可以根據(jù)自己的實驗需求選擇結直腸癌細胞株。