產(chǎn)品描述

神經(jīng)細胞無血清凍存液是一種無動物成分、無血清，化學(xué)成分明確的細胞凍存液，可在穩(wěn)定細胞表型和生長狀態(tài)和保持一些神經(jīng)干或祖細胞多能性的同時提供最佳的細胞回收效率。凍存細胞可在液氮中長期保存(>5 年)。

產(chǎn)品信息

表1. 試劑盒組成信息

產(chǎn)品特性

1、即用型細胞凍存液

2、高安全性，病毒、病菌和支原體等污染可能性低

3、細胞存活率和活力高，批次性差異小

操作步驟

一、細胞凍存

(1) 常規(guī)方法收集對數(shù)期的細胞于離心管中。

(2) 根據(jù)培養(yǎng)細胞的密度和凍存管的大小確定所需凍存細胞數(shù)。

(3) 將所需數(shù)目的細胞懸浮液置于離心管中，300g，5 分鐘離心收集培養(yǎng)細胞沉淀，徹底棄去離心管中的上清液。

(4) 加入適量的神經(jīng)細胞無血清凍存液于離心管中，使細胞濃度約為 1x106-1x107/ml。輕柔地混勻細胞，制成細胞混合液。

(5) 將離心管中的細胞混合液分裝于已標記的凍存管中，建議每管 1ml 或 1.5ml。

(6) 將分裝好的細胞凍存管放入凍存盒中于-80℃凍存1天，第二天轉(zhuǎn)移至液氮中保存。

二、復(fù)蘇步驟

(1) 從液氮中取出凍存的細胞，立即放入 37℃水浴槽中快速解凍。

(2) 待凍存管中細胞混合液完全融化后，立即加入 1ml 細胞培養(yǎng)基(含10μM Y-27632)于冷凍管中與細胞混合，將其中的混合液移至含有約 5ml 該細胞培養(yǎng)基(含10μM Y-27632)的離心管中，300g，5 分鐘離心收集凍存細胞沉淀，移去上清液(操作時小心，切勿將細胞沉淀移去)。

(3) 加入適量的新鮮細胞培養(yǎng)基(含10μM Y-27632)，使用移液管緩緩加入到細胞沉淀，輕柔地混勻，將細胞混合液移至事先準備好的培養(yǎng)容器中，24 h后換成不含Y-27632的培養(yǎng)基。

(4) 鏡檢細胞后，可根據(jù)各自研究的需要和方法經(jīng)行細胞常規(guī)培養(yǎng)。

注意事項

(1)本產(chǎn)品可常溫運輸，2-8℃保存，有效期12月，-20℃保存有效期24月。

(2)凍存細胞分裝后，應(yīng)盡快移入到-80℃超低溫冰箱，室溫時間不超過5分鐘。