本視頻為廈門逸漠生物科技有限公司出品關(guān)于凍存細(xì)胞收貨如何處理，我們對每一步操作都做了演示，以便實(shí)驗(yàn)者在收到細(xì)胞后，能正確地處理和復(fù)蘇。

凍存細(xì)胞復(fù)蘇實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

細(xì)胞培養(yǎng)基、6cm培養(yǎng)皿、10cm培養(yǎng)皿、酒精、紫外照射30min消毒滅菌

凍存細(xì)胞到貨處理

1.提前打開水浴鍋設(shè)置37C

2.在細(xì)胞間拆封包裹，取出凍存細(xì)胞

3.檢查管身是否在運(yùn)輸過程中破損，內(nèi)容物是否熔化，閱讀細(xì)胞說明書和檢查檢測報(bào)告

凍存細(xì)胞復(fù)蘇步驟

第一步：將取出的凍存管迅速放入37C水浴鍋中，輕輕搖晃，使細(xì)胞快速融化解凍，最好在1min內(nèi)完成

第二步：將凍存管移入離心機(jī)中1000rpm離心3min

第三步：取3mL完全培養(yǎng)基到一個新的6cm培養(yǎng)皿中，在培養(yǎng)皿上標(biāo)記細(xì)胞名稱，日期和所用培養(yǎng)基名稱

第四步：拿出一個新的10cm培養(yǎng)皿，加入8-10ml完 全培養(yǎng)基，在皿上標(biāo)記細(xì)胞名稱，培養(yǎng)基名稱，日期

第五步：離心后，以75%酒精噴凍存管外部，移入無菌操作臺內(nèi)，從凍存管中吸走上清，用1ml完全培養(yǎng)基重后，移入6cm中，“8字法 ”搖勻，鏡檢是否鋪勻，把培養(yǎng)皿放入C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，第二天觀察貼壁情況

注意事項(xiàng)

1.操作凍存細(xì)胞時應(yīng)使用手套、工作服和防護(hù)面具等，以避免事故的發(fā)生；

2.復(fù)蘇細(xì)胞時，應(yīng)保持管蓋擰緊，將管蓋以下部分浸入37℃水浴中解凍，解凍過程要快；

3.部分比較脆弱的細(xì)胞可不用離心，直接用培養(yǎng)基稀釋細(xì)胞懸液后進(jìn)行培養(yǎng)，但要及時通過換液等方式除去含DMSO的細(xì)胞凍存液；

4.請參照細(xì)胞說明書推薦的培養(yǎng)基和操作方法來培養(yǎng)細(xì)胞。