本視頻為廈門逸漠生物科技有限公司出品關(guān)于貼壁細(xì)胞復(fù)蘇步驟操作指南，我們對每一步操作都做了演示，以便實(shí)驗(yàn)者更好地理解貼壁細(xì)胞復(fù)蘇實(shí)驗(yàn)過程。

貼壁細(xì)胞復(fù)蘇實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

提前打開水浴鍋設(shè)置37C，提前開啟紫外照射30min消毒滅菌，工作臺開燈通風(fēng)10min，用75%酒精擦拭臺面

貼壁細(xì)胞復(fù)蘇所需試劑物品

細(xì)胞培養(yǎng)液，胰酶，PBS，培養(yǎng)皿等

細(xì)胞復(fù)蘇步驟

第一步：從液氮罐中迅速取出凍存管，立即放入37°C水浴箱中；

第二步：輕輕搖晃，使細(xì)胞快速融化解凍，最好在1min內(nèi)完成；

第三步：將凍存管移入離心機(jī)中1000rpm離心3min；

第四步：取4mL完全培養(yǎng)基到一個(gè)新的6cm培養(yǎng)皿中，在培養(yǎng)皿上標(biāo)記細(xì)胞名稱，日期和所用培養(yǎng)基名稱；

第五步：離心結(jié)束后，以75%酒精噴凍存管外部，移入無菌操作臺內(nèi)；

第六步：從凍存管中吸走上清，用1ml完全培養(yǎng)基重懸后，移入6cm皿中；

第七步：“8字法”搖勻后，鏡檢是否鋪勻；

第八步：把培養(yǎng)皿放入C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，第二天觀察貼壁情況。